NY∕T 3280.1-2018 病毒微生物农药 棉铃虫核型多角体病毒 第1部分：棉铃虫核型多角体病毒母药(农业)
|
ID： |
CBAE7546E17246C08C701668ACA1E152 |
|
文件大小(MB)： |
0.78 |
|
页数： |
13 |
|
文件格式： |
|
|
日期： |
2021-12-26 |
|
购买： |
文本摘录（文本识别可能有误，但文件阅览显示及打印正常，pdf文件可进行文字搜索定位）：
ICS 65.100,B 17 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3280.1 一2018,病毒微生物农药棉铃虫核型多角体病毒,第1 部分:棉铃虫核型多角体病毒母药,Virus-basedinsecticides-H elicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HearNPV )一,Part 1 :Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus technical concentrate(TK),2018 - 07 - 27 发布2018 - 12 一01 实施,中中华人民共和国农业农村部发布,目U 吕,NY/ T 3280 (( 病毒微生物农药棉铃虫核型多角体病毒》分为3 个部分:,一一第1 部分:棉铃虫核型多角体病毒母药;,一一第2 部分: 棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂;,一一第3 部分:棉铃虫核型多角体病毒悬浮剂,本部分为NY/ T 3280 的第1 部分,本部分按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,本部分由农业农村部种植业管理司提出并归口,NY/T 3280. 1-2018,本部分起草单位:农业农村部农药检定所、武汉中科威睿农业科技有限公司、中国科学院武汉病毒,研究所,本部分主要起草人:孙修炼、王晓军、肖凤平、杨峻、类承凤、张忠信、郭明程,I,NY/T 3280. 1-2018,1 范围,病毒微生物农药棉铃虫核型多角体病毒,第1 部分:棉铃虫核型多角体病毒母药,本部分规定了棉铃虫核型,装、储运、安全和保质期,与验收以及标志、标签、包,本部分适用于,下列,3. 1,棉铃虫核型多,centrate(TK),以棉铃虫核型多角,还会包含伴随病毒扩增而产生,3. 2,病毒包涵体polyhedral inclusion b创y,病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中,3. 3,生测效价比potency ratio,根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或,其生物学活性,3. 4,菌落形成单位colony fonning units( C町),由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落。指在琼脂平板上经过,一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位,1,NY/T 3280. 1-2018,3. 5,杂菌菌落总数number of microbial contaminants,将棉铃虫核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，所得到的微生物(真菌和细,菌)菌落数之和,4 要求,4. 1 外观,通常为灰白色或褐色均匀粉状物，无可见机械杂质，不应有结块;或者灰白色或褐色液体，存放过程,中可能出现沉淀，经搅动能恢复原状，不应有结块,4. 2 规范项目及指标,棉铃虫核型多角体病毒母药还应符合表1 的要求,表1 棉铃虫核型多角体病毒母药控制项目指标,项目指标,病毒包涵体数量， PIB/ g 或PIB/ mL 二?! 100 亿,生测效价比(标准品LC，o/ 待测样品LC，o ) , % 二主80.0,杂菌菌落总数， CFU/ g 或CFU/ mL ';;;;; 1. 0X 10',pH 5. 0 ~ 7. 5,(团体)干燥减量， % 王三5 .0,细度(通过7 5 μn 标准筛)， % 二?! 95.0,5 试验方法,5. 1 一般规定,除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/ T 6682 中规定,的三级水,5. 2 抽样,按GB/ T 1605 中"固体制剂采样""液体制剂采样"方法进行。用随机数表法确定抽样的包装件，最,终抽样量应不少于200 gCmL) ,5.3 PCR 扩增及DNA 测序法对病毒毒种的鉴定,通过提取试样中病毒DNA 作为模板，用HearNPV me53 基因和dbρ 基因的特异性引物进行PCR,扩增反应，琼脂糖凝胶电泳检测。当PCR 扩增片段大小约为0 . 5 kb 时，回收扩增片段，并克隆到T 载,体上，用M13 通用引物对克隆后的PCR 产物进行测序，将测序结果分别与棉铃虫核型多角体病毒CG4,株)的me53 基因和dbp 基因序列进行比对分析，试样与HearNPVCG4 株)的me53 基因及dbρ 基因的,一致性均应大于98 % ，即认定试样中的病毒为棉铃虫核型多角体病毒,棉铃虫核型多角体病毒有效成分描述参见附录A 。棉铃虫核型多角体病毒毒种的鉴定的方法按照,附录B 的规定,5. 4 病毒包涵体含量的测定,5.4. 1 方法提要,称取少量的病毒试样，用定量的水稀释成水悬浮液，并稀释至适当倍数后，滴加在血球计数板上在,光学显微镜下计数。根据血球计数板上病毒包涵体的数量以及稀释倍数，计算出单位质量(体积)病毒,的数量,5. 4. 2 仪器、设备,分析天平: 精确至0.0001 go,2,微量移液器:0.1 mL~ l mL ,容量瓶: 10mL ,光学显微镜,血球计数板及专用盖玻片,5. 4. 3 测定步骤,NY/T 3280. 1-2018,5. 4.3. 1 将试样充分振荡摇匀后，准确称取一定量的试样(精确到0 . 000 2 g) 置于1 0 mL 容量瓶中，加,水稀释至刻度，取此悬液稀释成适当浓度的悬浮液(最终稀释液使每小格有2 个~4 个病毒包涵体),计数时，将清洁干燥的血球计数板的+~…蜒量移液器吸取稀释后的病毒悬,液，滴于盖玻片边缘，让悬液自行-……团团.. -…-.自泡，充人悬……
……